Practicas demostrativas

 Practicas demostrativas

Practica demostrativa #1: donación de sangre

Aprendizajes:

• Es importante no confiarse en el proceso de extracción de las sangre, desde un inicio hay que tomar las medidas necesarias de esterilidad, y seguir todos los protocolos asignados de manejo de desechos.
• El agitador me parece un elemento muy importante porque cumplen dos funciones importantes, que son de medición del volumen y de mezclar cuidadosamente la sangre, para homogenizarla con los aditivos de la bolsa.
• Es importante conocer los criterios de selección, mitos y miedos, para poder educar a las personas referente a que es la donación, como se hace y así convencer quitándole el miedo a las personas. 
• La sangre se puede transfundir fraccionada y así llegar a más personas, tiene distintos hemocomponentes, los cuales tienen condiciones de almacenamiento diferentes necesarios para una conservación optima.

Preguntas:

1¿Qué son los crioprecipitados? (video: dona sangre, dona vida, 8:58 min)

El crioprecipitado por sus siglas (CRIO) es un hemoderivado, el cual tiene varios componentes como abundante fibrinógeno, factor de Von Willebrand, factor viii, factor xiii  y fibronectina.  Este básicamente es plasma congelado que después se descongela y queda con esos distintos componentes. Mas técnicamente, el plasma se congela para después ponerlo a descongelar lentamente de 1 a 6 °C, al hacer eso deja insoluble en distintos porcentajes a cada uno de los componentes ya dichos, las CRIO se congela de nuevo dentro de la bolsa estéril del plasma original y se puede almacenar hasta 36 meses desde que se realizó la donación. [1]

2. ¿ Cuales son las condiciones estandarizadas de almacenamiento de cada uno de los hemocomponentes?

- Para toda la sangre y glóbulos rojos: esto se refrigera a una temperatura entre 2 y 6 °C, es fundamental que se conserve esa temperatura porque a menos de 2 grados se hemolizan los glóbulos rojos y a más de 6 puede haber crecimiento bacteriano.

- Plasma fresco congelado: como su nombre lo indica, este se congela a una temperatura de -40°C, llega a tener una vida útil de un año. Es fundamental almacenarse a esa temperatura porque si no los distintos factores de coagulación, específicamente los lábiles se deterioran. 

- Crioprecipitado: después de realizar todo el proceso de elaboración del crioprecipitado, se almacena a -40 °C o menos, tiene una vida útil de un año.

- Plaquetas: se almacenan de 22 a 24 °C en un agitador de plaquetas e incubadora, no deben de ser refrigeradas, ellas tienen una vida útil de 3 a 5 días, según el tipo de bolsa de sangre utilizada.[2]

3. ¿Las personas con antecedentes con cáncer no puede donar?(documento información general al donante de sangre, pág. 12)

Efectivamente, personas con antecedentes de leucemias o linfomas no pueden donar [3]

Bibliografía:

1.https://www.elsevier.es/es-revista-revista-espanola-anestesiologia-reanimacion-344-articulo-el-crioprecipitado-ese-viejo-desconocido-S003493561400317X

2. https://rmlh.nic.in/index1.aspxlid=552&lsid=558&pid=47&lev=4&langid=1#:~:text=WHOLE%20BLOOD%20AND%20RED%20CELLS,air%20through%20out%20the%20equipment%20.

3. https://www.cancer.net/es/blog/2017-04/ayude-las-personas-con-c%C3%A1ncer-done-sangre-y-plaquetas

Practica demostrativa #2: Preparación de componentes sanguíneos

Aprendizajes:

• El fraccionamiento en bolsa triple y cuádruple son muy parecidos, con leves diferencias en el procedimiento al tener 3 o 4 bolsas pero obteniendo como resultado el mismo: plasma fresco congelado, glóbulos rojos concentrados y/o plaquetas.
• 
  

Preguntas:

• ¿Para que se hace el fraccionamiento de la sangre?

En el proceso de transfusión el paciente puede recibir sangre total o fraccionada, eso dependerá de la situación del paciente, la sangre total ayuda a una sola persona, está indicada para hemorragias donde la perdida significa el 25% del volumen sanguíneo, mientras que con el fraccionamiento de la sangre puede ayudar a tres vidas, debido a que pueden recibir plasma, glóbulos rojos o plaquetas, dependiendo ya de situaciones más particulares como anemias, trombocitopenias, déficit de factores de la coagulación. [1]

Referencias

1. Salazar, M. (2003). Guías para la transfusión de sangre y sus componentes. Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health, 13(3). https://www.scielosp.org/pdf/rpsp/2003.v13n2-3/183-190/es

Practica demostrativa #3: Hemoclasificación Sanguínea ABO y Rh

Aprendizajes:

• Para la determinación del grupo ABO es muy importante entender varias puntos como el porqué se dan esas reacciones antígeno-anticuerpos, cuales antígenos y/o anticuerpos tiene cada grupo y como se comportarían cada una de ellas frente a las reacciones. Para la interpretación de los resultados lo analizaría de la siguiente manera:

- Cuando se da un resultado positivo para A: es porque hubo aglutinación con el anticuerpo anti-A y eritrocitos B, porque recordemos que los eritrocitos A tienen antígeno A, que aglutinará con el anti-A añadido (reactivo azul) y con el anti-A que tienen los eritrocitos B.

- Cuando se da un resultado positivo para B: es porque hubo aglutinación con el anticuerpo anti-B y eritrocitos A, porque recordemos que los eritrocitos B tienen antígeno B, que aglutinará con el anti-B añadido (reactivo amarillo) y con el anti-B que tienen los eritrocitos A.

- Cuando se da un resultado positiva para O: es porque hubo aglutinación con los antígenos de los eritrocitos A y B, porque recordemos que el O no tiene antígenos pero si anticuerpos anti-A y anti-B.

- Cuando se da un resultado positivo para AB: es porque hubo aglutinación con los anticuerpos anti-A y anti- B añadidos azul y amarillo respectivamente, recordemos que el grupo AB no tiene anticuerpos pero si antígenos A y B.

• Video: Determinación de grupo sanguíneo QFB Universidad Justo Sierra: el primer error que se nota es al min 1:32 cuando el estudiante hace el procedimiento sin equipo de protección individual como guantes; también pensé que había un error porque no se centrifugó la sangre pero resulta que se puede hacer con la sangre entera, suspensión al 10% o al 35-45%; la prueba en placa solo mira la parte directa o sea la globular más no la sérica por lo tanto no hubo búsqueda de anticuerpos (lo cual hace esta prueba menos sensible y ya no se hace de rutina), y no se rotulo la placa.
• Video: Realización de grupos sanguíneos: en este video tampoco usa guantes, la solución salina no rotulada, al igual que los tubos lo cual le puede generar confusión en la gradilla y en la centrifuga.
• el control en las tarjetas en gel sirve para evaluar la calidad de la muestra, no para validar la prueba o el equipo.

Preguntas:

• ¿Cómo se interpretan las aglutinaciones?

[1]

• ¿Por qué en algunas pruebas usan el anticuerpo anti-AB y en otras no?

Lo utilizan con un opcional ya que perfectamente pueden usar el anti A y anti B por separado para determinar el AB, pero algunos lo usan como reactivo confirmatorio frente a anti A y anti B, debido a que para poner un ejemplo si aglutina con anti-A y no con anti-B, significa que tiene antígeno A pero no el B, y como confirmación se debe de presentar aglutinación con el anti-AB pero solo por la parte de la reacción con el antígeno A.

• ¿Cuáles son las ventajas y desventajas que tiene la técnica en tubo vs las tarjetas de gel?

La técnica en tubo es bastante accesible, no tiene unos costos elevados, lo que la hace una prueba que puede desarrollarse de rutina, caso contrario con las tarjetas de gel que si elevan el costo del procedimiento pero le brindan una mayor sensibilidad y especificidad, aunque también es cierto que como todo procedimiento puede presentar falsos positivos y negativos debido a contaminación del material, exceso de muestra o en la lectura de las tarjetas.

• ¿Qué es la solución de baja fuerza iónica y para qué sirve?

Esta solución está compuesta por glicina, cloruro de sodio, tampón fosfato y albumina bovina, es utilizada en reacciones inmunohematológicas debido a que ayuda en la reducción de la fuerza iónica del sistema lo que provoca que aumente la tasa de unión entre el antígeno y el anticuerpo, logrando así, que el tiempo de incubación sea menor y obteniendo una mayor sensibilidad [3]

Referencias:

[1] Rodríguez Sánchez, L. (2017). El laboratorio de inmunohematología. Octubre-Diciembre, 10(1), 2017–2022. https://www.medigraphic.com/pdfs/transfusional/mt-2017/mt171a.pdf

[2] Jeanneth Parra Jaramillo, K. (2013). “FRECUENCIA DE SUBGRUPOS DEL ANTÍGENO A EN DONANTES VOLUNTARIOS QUE ACUDEN AL ‘HEMOCENTRO DE LA CRUZ ROJA ECUATORIANA’, AL NORTE DE QUITO - ECUADOR, 2013.” http://repositorio.puce.edu.ec/bitstream/handle/22000/11805/Frecuencia%20de%20subgrupos%20del%20Ant%C3%ADgeno%20A%20en%20donantes%20voluntarios%20que%20acuden%20al%20Hemocentro%20de%20CRE-20.pdf?sequence=4

[3] Inserto Solución lisante - Reactivo potenciador Antígeno/Anticuerpo. 

Practica demostrativa #4:Prueba de antiglobulina directa e indirecta

Aprendizajes

- Si tiene un anemia hemolítica autoimmune es porque tienen auto-anticuerpos, al examen se le añade anticuerpos (suero de Coombs de conejo) contra los autoanticuerpos, si hay auto-anticuerpos entonces hay aglutinación.

- Coombs indirecta se hace con el suero/plasma, el principio es el mismo pero se da un complejo inmune in vitro, al suero se le añade glóbulos rojos para que reaccione, se incuba 37 grados Celsius. Se forma el complejo y de ahí en adelante se hace el mismo proceso que en el coombs directo que se le añade anticuerpos contra los autoanticuerpos. Se le hace rastreo de auto anticuerpos por medio de diluciones entre más diluido más autoanticuerpos tiene. 

- El suero de Coombs se compone de dos partes: IgG purificada y el C3d del sistema del complemento, funcionan al unirse hacen un complejo de detección de Ac, para hacer el Ac-Ag. 

Pruebas cruzadas: se compone de tres partes:

• 1. Prueba mayor (D): Es útil porque ayuda a confirmar si existe compatibilidad ABO entre el receptor y el donador, para ello se detecta anticuerpos en el suero del paciente que no se hayan demostrado en la prueba de tamizaje. Se utiliza el suero del receptor y los eritrocitos lavados del donante. Si da positiva la prueba (aglutinación) significa que el receptor no puede ser transfundido con los eritrocitos del donante, porque tiene los anticuerpos contra los antígenos del donante.

• 2. Prueba menor (R):esta ayuda a la detección de anticuerpos irregulares en el suero del donador y ratifica algún error de clasificación ABO/Rh. Se utiliza el suero o plasma del donante y  los eritrocitos del receptor. Si la prueba da positiva, significa que el receptor no puede recibir plasma del donador, porque el donador tiene anticuerpos que reaccionan con los antígenos del receptor.

tomado de: video

• 3. Prueba autotestigo (AT): Permite detectar una prueba de antiglobulina directa positiva (autoanticuerpos), así como la presencia de rouleaux y otras anormalidades autoinmunes (AHAI). Se utilizan los eritrocitos del receptor y el suero del receptor.

tomado de: video

Se puede hacer en dos fases, en fase salina o albumina, a cada tubo se le agrega lo anteriormente dicho, se incuba a 37°C por 30 min, se centrifugan los tubos a 2000 RPM por 1min y se procede a lavar con solución salina. Se le agrega la antiglobulina (reactivo de Coombs) y se mira si hay aglutinación. Este sería el método manual porque ahora ya hay equipos que hacen todo.

Preguntas

• ¿ Qué son y cómo se interpretan las disoluciones del suero?

Es una prueba semicuantitativa, se basa en diluciones dobles del suero del paciente, se diluye con solución salina isotónica, es un poco subjetiva y depende de la visión de la persona que lo mire para su correcta interpretación, estas disoluciones nos permite ver la cantidad de autoanticuerpos que se tiene, entre mayor sea la dilución mayor es el numero de autoanticuerpos y viceversa. [1]

• ¿Cual es la función de las tarjetas de gel antiglobulina directa poliespecifico para IgG y c3d? Y tarjetas monoespecificas?

La PAD (prueba de antiglobulina directa) inicialmente se debe realizar con suero antiglobulina humana, poliespecifico es decir que permita la detección tanto IgG como C3d. 

Dependiendo del resultado se procede, si la prueba poliespecífica es positiva, se debe investigar con sueros monoespecíficos como el anti-IgG y anti-C3d, lo que permite poner en evidencia el proceso inmunológico y colaborar en la determinación del diagnóstico del paciente[2].

Tarjeta poliespecifica

Tarjeta monoespecifica 

Referencias:

1. Rodríguez Sánchez, L. (2017). El laboratorio de inmunohematología. Octubre-Diciembre, 10(1), 2017–2022. https://www.medigraphic.com/pdfs/transfusional/mt-2017/mt171a.pdf

2. Ministerio de Salud, M. RECOMENDACIONES PARA LA PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA. Retrieved June 30, 2022, from https://www.ispch.cl/sites/default/files/Recomendaciones%20para%20la%20prueba%20de%20antiglobulina%20directa.pdf